Prueba de PCR realizada en Síndrome de Cushing

TEMA	Aumento de la expresión de CYP17 y CYP11B1 en el síndrome de Cushing subclínico debido a adenomas suprarrenales.
OBJETIVO	Determinar si la expresión de enzimas esteroidogénicas está asociada con el patrón secretor de esteroides del Síndrome de Cushing subclínico (SCS) mediante la investigación de la expresión de ARNm y proteínas de CYP17 y CYP11B1 en adenomas SCS, cortezas suprarrenales normales (NA), adenomas suprarrenales no funcionales ( NFA) y adenomas productores de cortisol (CPA).
MUESTRA	Tejido de la glándula suprarrenal
TIPO DE ÁCIDO NUCLEICO	ARN y proteínas totales
GEN	CYP11B1 y CYP17
PCR	Las reacciones en cadena de la polimerasa (PCR) se realizaron utilizando un sistema de PCR en tiempo real rápido (qPCR), con un volumen total de 20 µL por reacción. Todas las PCR en tiempo real se realizaron por triplicado. PCR cuantitativa en tiempo real se realizó para analizar la expresión de los genes CYP17 y CYP11B1 en diferentes tejidos. Los niveles de expresión de los genes diana se normalizaron contra la β-actina, utilizada como control interno; Se usó tejido suprarrenal normal como calibrador.
VISUALIZACIÓN	Análisis de Western Blot Se realizó para determinar el ARNm y la expresión de proteínas de CYP17 y CYP11B1 en diferentes tejidos. La expresión de CYP17 y CYP11B1 en los tumores adrenocorticales y se comparó con la expresión en NA.